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液氮儲罐細(xì)胞冷凍以及注意哪些問題
<一>、液氮儲罐細(xì)胞冷凍
液氮儲罐細(xì)胞凍存是細(xì)胞生存的重要要領(lǐng)之一。使用凍存技能將細(xì)胞置于-196~C液氮中低溫生存,可以使細(xì)胞臨時離開生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性生存起來,如許在的時間再蘇醒細(xì)胞用于實行。并且適度地生存肯定量的細(xì)胞,可以防備因正在造就的細(xì)胞被污染或其他不測變亂而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外,還可以使用細(xì)胞凍存的情勢來購置、寄贈、互換和運送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時向造就基中參加掩護劑——終濃度5%~15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點低落,加之在遲鈍凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)水分透出,淘汰了冰晶形成,從而制止細(xì)胞毀傷。尺度冷凍速率開始為-1到-2℃/min,當(dāng)溫度低于-25℃時可加快,到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。
現(xiàn)在常用的掩護劑為(DMSO),它們對細(xì)胞分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞。
實行質(zhì)料
儀器:液氮儲罐、凍存管(塑料螺口凍存管或安瓿瓶)、離心管、吸管、離心機等
試劑:0.25%胰酶、造就基、含掩護劑的造就基(即凍存液)
附:凍存液配制:造就基參加甘油或,使其終濃度達5-20%。掩護劑的種類和用量視差別細(xì)胞而差別。配好后4℃下生存。
在生產(chǎn)過程中,由于換熱器管板受水分沖刷、氣蝕和微量化學(xué)介質(zhì)的腐蝕,管板焊縫處經(jīng)常出現(xiàn)滲漏,導(dǎo)致水和化工材料出現(xiàn)混合,生產(chǎn)工藝溫度難以控制,致使生成其它產(chǎn)品,嚴(yán)重影響產(chǎn)品質(zhì)量,降低產(chǎn)品等級。冷凝器管板焊縫滲漏后,企業(yè)通常利用傳統(tǒng)補焊的方法進行,管板內(nèi)部易產(chǎn)生內(nèi)應(yīng)力,致使其它換熱器出現(xiàn)滲漏,檢驗設(shè)備情況,反復(fù)補焊、實驗,2~4人需要幾天時間才能完成,使用幾個月后管板焊縫再次出現(xiàn)腐蝕,給企業(yè)帶來人力、物力、財力的浪費,生產(chǎn)成本的增加。
<二>、使用液氮儲罐需要注意些哪些問題
LN2儲罐是儲存液態(tài)氮氣的壓力容器,為了滿足運輸?shù)臈l件,一般液氮儲罐都做了防震設(shè)計。液氮儲罐除了可以靜置貯存以外,還可以在充裝液氮的狀態(tài)下,用做運輸使用。但是要特別注意避免劇烈的碰撞和震動,因為液氮儲罐如果在高溫高壓,或者強烈撞擊下是有可能會發(fā)生的。那么現(xiàn)在跟大家說一下在使用液氮儲罐過程中,需要注意的事項。
一般在使用液氮儲罐時,要先了解液氮儲罐的相關(guān)使用知識。當(dāng)設(shè)備達到的使用年限時,需要及時處理新,即便還沒有超過保質(zhì)期,設(shè)備也有可能老化,從而導(dǎo)致使用效果不好,所以還需要大家定期地對液氮儲罐做好檢查。
然后還有液氮儲罐的清潔問題,液氮儲罐需要在一個無脂無油的地方使用,如果沒有做到的話,也會造成不好的使用效果。
另外要注意:液氮儲罐在充填液氮時,先是要檢查外殼是否有凹陷,真空的排氣口是否完好。若被碰壞,真空度就會降低,嚴(yán)重時進氣不能保溫,這樣罐上部會發(fā)生結(jié)霜的情況,液氮損耗變大,便失去了繼續(xù)使用的價值了。然后檢查液氮儲罐的內(nèi)部,若有異物,及時取出,以防內(nèi)膽被腐蝕。